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BIOBASIC液相色谱柱峰拖尾原因
点击次数:1123 发布时间:2016-08-24
  
  
  A)BIOBASIC液相色谱柱污染
  
  如果色谱柱开始使用时峰形正常,使用一段时间后逐渐出现峰拖尾,则色谱柱被污染的可能性很大,这时需要对色谱柱加强冲洗,即使用比方法流动相更强的溶剂冲洗色谱柱。BIOBASIC液相色谱柱还可以反冲,反冲的冲洗效率比正着冲要更高。
  
  建议做好样品前处理,但如果前处理后依然比较脏,强烈建议配置保护柱。一旦峰形变差,柱效下降,应及时更换保护柱芯。
  
  B)柱外死体积
  
  较大的柱外死体积会导致峰形扩展和峰拖尾,建议仔细检查样品经过的所有管路及各连接部位,请使用合适的管线和接头。
  
  C)样品过载
  
  D)样品溶剂过强
  
  样品溶剂的强度应不高于流动相的洗脱强度。使用流动相溶解样品或使用比初始比例流动相洗脱能力更弱的溶剂来溶解样品。
  
  E)组分共流出
  
  如果一小峰包含在一大峰后面,这一共流出的峰会显现为拖尾峰。需要做好色谱条件的优化,有条件时可利用DAD检查峰纯度。
  
  F)流动相的pH在样品pKa附近
  
  流动相的pH在样品的pKa附近时,样品解离平衡不充分,容易出现前伸峰或拖尾峰。所以流动相的pH应尽量选在样品pKa±1.5以外
  
  G)BIOBASIC液相色谱柱填料表面的惰性不够好
  
  键合硅胶型填料表面的残留硅羟基或金属杂质易与待测化合物发生二次作用而导致拖尾。
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