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Hypersep固相萃取的操作步骤
点击次数:600 更新时间:2023-02-14
  Hypersep固相萃取是近年发展起来的一种样品预处理技术,由液固萃取和柱液相色谱技术相结合发展而来,主要用于样品的分离、纯化和浓缩,与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率,更有效的将分析物与干扰组分分离,减少样品预处理过程,操作简单、省时、省力。
 
  操作步骤:
 
  1、固相萃取柱的预处理活化:
 
  用适当的溶液对固相萃取柱进行预处理活化,可以展开碳氢链,增加和目标分析物作用的表面积,可以除去柱上吸附的对分析有影响的杂质,保证良好的萃取再现性,同时注意在上样前预处理好的固相柱必须保持湿润。
 
  2、 固相萃取柱的上样:
 
  将样品加于固相萃取柱中,用正压或负压使样品通过柱子,控制好样品的流速,对于生物样品,一般控制在1、5 ml/min。对于以离子交换为作用机理的萃取,样品通过固相萃取柱的速度应该适当的降低,以保证分析物有足够的时间与SPE柱填料的离子交换功能团发生充分的作用。
 
  3、固相萃取柱的淋洗:
 
  用适当的清洗溶剂选择性地洗掉附着力弱的杂质而保留目标分析物于固相萃取柱上。清洗溶剂的选择取决于最后的分析手段。
 
  4、 固相萃取柱的干燥:
 
  如最后的清洗溶剂为缓冲溶液或水溶性有机溶剂,而分析手段为反相HPLC,固相柱上的残留水对分析影响不大。但是,当洗脱剂为非水溶性有机溶剂或分析手段又为GC或GC-MS
 
  时,固相柱的干燥就显得特别重要。
 
  5、目标分析物的洗脱:
 
  选择洗脱溶剂时必须考虑有足够强度的洗脱剂,要以最小用量的洗脱剂将尽可能多的目标分析物洗脱下来;同时还要兼顾洗脱剂必须有足够的选择性,选择只将目标分析物洗脱,而吸附力强的杂质保留在柱上。
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