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Acclaim液相色谱柱正确使用缓冲盐的方法是什么
点击次数:57 发布时间:2021-10-20
  Acclaim液相色谱柱在使用前,先进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行,只有这样,测得的结果才有可比性。
 
  本产品可适用范围广,从极性化合物到非极性化合物都可获得良好的分离,在碳水化合物如低聚糖、苷类糖化学,生药学和天然产物化学,生物物质如多肽、蛋白、核酸等多个领域发挥重要作用。
 
  正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出,因此正确使用缓冲盐的方法可归结为一句话:使用前要过滤,使用后要冲洗。具体方法如下:
 
  1、等度条件:使用缓冲盐前和使用后需用过渡流动相以1、0ml/min流速冲洗60min;使用后去除缓冲盐的另一个方法是用过渡流动相以0、2ml/min流速冲洗色谱柱过夜。
 
  2、梯度条件:用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前,用与初始流动相组成相同的过渡流动相以1、0ml/min流速冲洗60min,再用该过渡流动相以1、0ml/min冲洗色谱柱120min。含缓冲盐流动相的梯度设定应尽量平缓,以避免梯度过程中缓冲盐析出。
 
  3、缓冲盐析出的补救方法:
 
  a、用甲醇/20/80以1、0ml/min流速35摄氏度条件下反向冲洗色谱柱120min
 
  b、用甲醇/水=20/80以0、2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。
 
  使用Acclaim液相色谱柱可以延长色谱柱的寿命。但是考虑是否使用保护柱前,建议评估以下几点:
 
  (1)保护柱也不便宜,所以要考虑购买保护柱的费用是否能由所增加的色谱柱寿命补偿回来;
 
  (2)保护柱的寿命有多长?须注意何时需要换保护柱芯,不要因为更换太晚而污染到色谱柱;
 
  (3)如何冲洗保护柱?冲洗时需要将保护柱和色谱柱分开冲洗,以免将累积在保护柱内的不纯物冲洗到色谱柱中;
 
  (4)不要期望因为加了1-2cm的保护柱而会增加柱效。装上保护柱虽然类似增加柱长,但是使用保护柱也增加了两个接头和连接管路,这些会造成仪器系统柱效减少,因此如果能维持不装保护柱时的柱效就不错了。
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